• / 74
  • 下载费用:23.98 积分  

医学免疫学-抗体.ppt

资源描述:
《医学免疫学-抗体.ppt》由本站会员分享,支持在线阅读,更多《医学免疫学-抗体最新版.ppt》相关的内容可在三九文库网上搜索。

抗体(Antibody,Ab)P2939,第四章,医学免疫学,主讲:陆春雪,引言,非典战役中的英雄人物姜素椿教授,引言,一、定义1、抗体(antibody,Ab):B细胞或记忆B细胞增殖分化为浆细胞所产生的,能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。,概述,EmilvonBehring(18451917),19世纪80年代末即发现抗体,1937年,用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、1、2、及球蛋白等组分,证实抗体活性主要存在于区,也可延伸到区和2球蛋白区。,2、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig):具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。,概念不同Ab都是Ig,Ig不一定是Ab(Ig包含Ab)Ab是生物学功能上概念。

Ig是化学结构上概念,二、Ab与Ig的区别与联系,概述,第一节抗体的结构,一、抗体的基本结构,抗体分子的基本结构,四肽链结构:两条相同的重链(H链)和两条相同的轻链(L链)以二硫键连接而成。,(一)重链和轻链,H链:分子量约为5075kD,450550个氨基酸残基L链:分子量约为25kD,约214个氨基酸残基,重链(H链)类与亚类,IgA:IgM:IgE:IgD:IgG:,抗体结构示意图,类:重链抗原性的差异,不同类的抗体分子,链内二硫键的数目和位置、连接寡糖的数量、结构域的数目及铰链区的长度等均不完全相同。,亚类:H链铰链区氨基酸的组成,H链二硫键的数目、位置,IgG:IgG1IgG4IgA:IgA1、IgA2。

链链,轻链(L链)型与亚型,L链恒定区氨基酸,链恒定区个别氨基酸:14,每类Ab的轻链都可以有链和链两型轻链的功能无差异不同种属生物,两型轻链的比例不同,Ab的重链和轻链都可折叠为数个球形结构域,每个结构域一般具有其相应的功能。,(二)可变区和恒定区,抗体的结构域(功能区),可变区(V区):H链和L链靠近N端约110个氨基酸的序列变化很大,称为可变区。,高变区(hypervariableregion,HVR),CDR共同组成Ig的Ag结合部位,决定着Ab的特异性,负责识别及结合Ag。,骨架区(frameworkregion,FR),恒定区(constantregion,C区):H链和L链靠近C端的其余氨基酸数量、种类、排列顺序相对稳定。

称为恒定区。,L链:VL,CLH链:IgG、IgA、IgD:VH,CH1,CH2,CH3IgM、IgE:VH,CH1,CH2,CH3,CH4,同一种属的个体,所产生的针对不同Ag的同一类别的Ab,其免疫原性相同。,(三)铰链区:位于CH1与CH2间,富含脯氨酸,易伸展弯曲,有利于Fab段同时结合两个不同距离的抗原表位;易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解;有利于Ab分子变构,暴露其补体结合位点;五类Ab或亚类的铰链区不尽相同*IgG、IgA、IgD有铰链区*IgM和IgE无铰链区,二、抗体的辅助成分,(一)J链(joiningchain):浆细胞合成,将单体Ab分子连接成多聚体。(二)分泌片(secretorypiece。

SP)*保护sIgA的铰链区免受蛋白水解酶降解;*介导IgA二聚体从黏膜下到黏膜表面的转运,三、抗体分子的水解片段目的:研究Ab的结构和功能分离纯化特定的Ab多肽片段木瓜蛋白酶(papain)水解IgG2个Fab段(fragmentantigenbinding,抗原结合片段)1个Fc段(fragmentcrystallizable,可结晶片段)胃蛋白酶(pepsin)水解IgG1个F(ab)2pFc,抗体的水解片段,水解片段意义:*阐明Ab分子生物学作用;*用作生物制品:去掉Fc段,减少超敏反应发生。,第二节抗体的多样性与免疫原性,多样性:自然界存在的抗原数目繁多,每一种抗原分子的结构又十分复杂。

含有多种不同的抗原表位。理论上,每一种抗原表位可诱导产生一种特异性抗体,以及针对同一抗原表位可产生不同类型的抗体。,Ab的免疫原性:Ab具有二重性,可以是抗体,也可以成为抗原,表现为三类不同的抗原表位:(一)同种型:存在于同类抗体分子中的抗原表位,是同一种属所有个体Ab分子共有的抗原特异性标志,为种属型标志,存在于AbC区。,张三的IgG,李四的IgG,C区,张三IgG,羊,羊抗张三IgG的抗体,所有人的IgG,结合,(二)同种异型:同一种属不同个体间Ab分子所具有的不同抗原特异性标志,为个体型标志。存在于AbC区,由同一基因座的不同等位基因所编码,均为共显性。,张三的IgG,李四的IgG,(三)独特型(idiotype。

Id):同一种属、同一个体来源的抗体分子,CDR区的氨基酸序列的不同,显示不同的免疫原性,是每个Ab分子特有的抗原特异性标志,其表位又称为独特位(idiotope)。存在于V区。独特型可刺激异种、同种异体以及自体产生相应Ab,即抗独特型抗体(AId或Ab2),同一个体内,特异性不同的抗体,其V区抗原特异性不同,伤寒杆菌的抗体,痢疾杆菌的抗体,V区,Ab2、Ab2负反馈调节Ab1;Ab1、Ab3负反馈调节Ab2,第三节抗体的功能,一、识别抗原:V区的功能,V区的CDR在识别和结合特异性抗原中起决定性作用,实际意义:*中和效应:中和毒素、病毒,阻止细菌吸附*启动体液免疫应答:BCR(mIgM、mIgD)特异性识别Ag分子*抗原与抗体的检测:。

二、激活补体:C区的功能,Ab(IgM、IgG13)与Ag结合构型改变位于CH2/CH3功能区的补体结合位点暴露激活补体经典途径IgG4、IgA和IgE的凝聚物激活补体旁路途径,1、调理作用:IgG与细菌等颗粒性抗原结合后,可通过其Fc段与巨噬细胞和中性粒细胞表面相应FcR结合,从而促进吞噬细胞的吞噬作用。,三、结合Fc受体:C区功能,2、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,ADCC):IgG与肿瘤或病毒感染的靶细胞结合后,可通过其Fc段与NK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞表面相应FcR结合,直接杀伤靶细胞。,IgE的Fc段可与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的高亲和力IgEFc受体(FcR)结合。

并使其致敏。若相同变应原再次进入机体与致敏靶细胞表面的特异性IgE结合,即可使之脱颗粒,释放组胺等生物活性介质,引起型超敏反应。,3、介导型超敏反应,四、穿过胎盘和黏膜:C区功能,穿过胎盘:IgG意义:新生儿抗感染穿过黏膜:sIgA意义:黏膜局部抗感染,第四节各类抗体的特性与功能,一、IgG单体分子,4个亚类;血清中含量最高,约占血清总Ig的75%;半衰期最长(2023天),是再次应答的主要抗体;也是抗感染的主要抗体;是唯一能通过胎盘的抗体;,与细胞表面FcR结合调理作用、ADCC能结合SPA纯化抗体、免疫诊断参与II、III型超敏反应,二、IgM1、占血清Ig含量的510%;2、两种形式存在单体:mIgM表达于B细胞表面。

构成BCR分泌型:五聚体,分子量最大;3、个体发育中最早合成和分泌的Ab;4、IgM不能通过胎盘脐带血IgM升高提示胎儿有宫内感染;,5、初次体液免疫应答中最早出现的Ab早期抗感染;6、半衰期:5天血清中特异性IgM增高提示有近期感染;7、激活补体能力强;8、自身抗体(如:类风湿因子)、天然血型Ab为IgM;,1.两种类型:血清型单体,血清中;分泌型二聚体,由J链连接,含上皮细胞合成的SP,经分泌性上皮细胞分泌至外分泌液中;2.占血清Ab含量的1015%;,三、IgA,3.黏膜局部抗感染免疫的主要Ab:抗感染:阻止病原体黏附到细胞表面中和毒素4.婴幼儿从母体初乳中获得sIgA,属重要的自然被动免疫。

四、IgD1.单体分子;2.存在形式:分泌型:血清中,功能不清;膜结合型:构成BCR,是B细胞发育成熟的重要标志。未成熟B细胞:mIgM成熟B细胞:mIgM+mIgD3.占血清Ig含量的0.2%;4.半衰期:3天。,mIgM,mIgD,成熟B细胞,未成熟B细胞,五、IgE1.单体分子;2.血清中含量最低(占Ig的0.002%);3.半衰期:2天;4.黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌;5.亲细胞抗体,介导I型超敏反应;6.过敏性疾病和某些寄生虫感染患者血清中特异性IgE水平增高。,第五节人工制备抗体,1、制备抗血清多克隆抗体2、单克隆抗体技术3、基因工程抗体,1、含义:指由多个B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原表位的多种抗体混合物。

如:免疫血清(含多种特异性抗体)优点:作用全面,来源广泛,制备容易。缺点:特异性不高,易发生交叉反应。,一、多克隆抗体,二、单克隆抗体(monoclonalantibody,mAb),针对单一抗原表位的特异性抗体。,定义:,杂交瘤细胞:骨髓瘤细胞无限增殖;免疫B细胞合成、分泌特异性抗体。杂交瘤技术:HAT培养基次黄嘌呤(H)氨基蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T),每一个杂交瘤细胞由一个B细胞和一个骨髓瘤细胞融合而成,单克隆抗体的制备过程,抗原(多表位)免疫小鼠骨髓瘤细胞培养免疫脾细胞骨髓瘤细胞细胞融合HAT培养基杂交瘤细胞的筛选与克隆化mAb的大量制备,PEG,优点:结构均一、纯度高、特异性强、效价高、血清交叉反应少或无缺点:鼠源性对人具有较强的免疫原性。

反复人体使用后可诱导产生人抗鼠的免疫应答导致机体免疫损伤。,三、基因工程抗体(geneticengineeringantibody)原理:借助DNA重组和蛋白质工程技术,按人们的意愿在基因水平上对Ig分子进行切割、拼接或修饰,重新组装成新型抗体分子。,根本出发点:解决抗体的鼠源性问题优点:人源化或完全人源的抗体,均一性强,可工业化生产;缺点:亲和力弱,效价不高。,基因工程抗体,思考题1、掌握抗体的结构与功能。2、比较并熟悉各类抗体的异同点。3、简述人工制备抗体的方法。,60,1.木瓜蛋白酶水解IgG所获片段中,能与抗原特异结合的是AFab段BFc段CF(ab)2段DpFc段E以上均不对,2.Ab的绞链区位于AVL与CH1之间BVH与CH1之间CCH1与CH2之间DCH2与CH3之间ECH3与CH4之间。

3.下列五类Ab的特性哪项是错误的AIgG是唯一通过胎盘的免疫球蛋白BSIgA多为双聚体CIgM分子量最大D免疫应答过程中产生最早的是IgGE正常血清中IgE含量最少,4抗体的超变区位于A.VH和CHB.VL和VHC.Fc段D.VH和CLE.CL和CH,5未成熟B淋巴细胞的mIg类别是A.mIgMB.mIgGC.mIgED.mIgAE.mIgD,6关于IgE特性的描述,下列哪些是正确的A.IgE在五类Ig中含量最低B.IgE有CH4区C.IgE可介导型超敏反应D.IgE有亲细胞性E.IgE在种系发育过程中最早产生,1血清中含量最高的Ab是,含量最低的Ab是。2在五类Ab中,分子量最大的是;参与粘膜免疫的主要是。

3机体初次受微生物感染时,血清中最先增高的抗体是。4用木瓜蛋白酶水解IgG,可得到两个相同的片段和一个片段。5人工制备的抗体可分为多克隆抗体、和三类。6ABO天然血型抗体属类抗体。7在五类Ab中,没有绞链区的是和。8发挥调理作用和ADCC作用的的Ab是,介导型超敏反应的Ab是。9根据抗原特异性的不同将Ab分成五类,根据抗原特异性的不同将Ab分成两型。10Ab的轻链有两个结构域(功能区),即和。,

展开阅读全文
 温馨提示:
下载提示
关于本文
本文标题:医学免疫学-抗体.ppt
链接地址:https://www.999doc.com/61660.html
关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服 - 联系我们

copyright © 2016-2021  999doc三九文库网 版权所有

经营许可证编号:苏ICP备2020069977号  网站客服QQ:772773258  联系电话:0518-83073133